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质粒辅助重组腺病毒相关病毒的制备和纯化

Production and purification of helper free recombinant adeno-associated virus 2

摘要:

目的探讨制备、纯化2型重组腺病毒相关病毒(rAAV2)载体的简便、高效的方法.方法采用磷酸钙方法将质粒辅助腺病毒相关病毒重组系统转染HEK293T细胞,重组rAAV,通过氯仿-PEG8000/NaCl-氯仿法结合超滤纯化rAAV病毒.采用蛋白电泳和Western 印迹检测病毒外壳蛋白,斑点杂交和病毒转染检测病毒的物理和感染滴度.结果 rAAV物理滴度为2×1013/ml,感染滴度为5×1011/ml.结论本实验方法简便、高效,不需要特殊的仪器设备,在普通实验室均可完成,制备的病毒纯度和滴度均可以满足动物实验需要.

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作者: 李桂林 [1] 王任直 [1] 王欣 [2] 窦万臣 [1] 张波 [1] 田士强 [1] 任祖渊 [1] 苏长保 [1]
期刊: 《中华医学杂志》2003年83卷14期 1255-1258页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
关键词: 依赖病毒质粒
分类号: R37
栏目名称: 论著
DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2003.14.013
发布时间: 2003-10-24
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