缺氧和高浓度葡萄糖对体外培养人视网膜色素上皮衍生因子表达的影响
Downregulation of the pigment epithelium derived factor by hypoxia and elevated glucose concentration in cultured human retinal pigment epithelial cells
目的探讨缺氧和高糖对体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)的影响.方法我们通过实验性研究在氧正常或缺氧(1%O2)加或不加高浓度葡萄糖的条件下,培养的人RPE细胞,通过反转录PCR和实时定量分析检测PEDF和VEGF的表达,使用Western印迹分析检测PEDF和VEGF蛋白水平.结果缺氧情况下,VEGF表达和蛋白水平增加(P=0.001);缺氧加25 mmol/L葡萄糖后增加更加明显(P<0.001).缺氧情况下PEDF表达水平与正常氧环境比较无统计学意义(P=0.251);但加葡萄糖后PEDF mRNA表达水平低于正常对照.结论体外培养的人RPE细胞在缺氧条件下PEDF表达降低不明显,这提示缺氧间接影响体外RPE细胞的PEDF下调,高葡萄糖直接下调PEDF的表达,同时增加VEGF的表达,这可能支持体内高血糖是糖尿病最危险的"糖毒性"观点.
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