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沉默HIF-2α对低氧下接种乳腺球细胞的裸鼠移植瘤生长的影响

Silencing hypoxia inducible factor-2α gene by small interference RNA inhibits the growth of mammosphere cells in nude mice under hypoxic microenvironment

摘要:

目的 探讨RNA干扰(RNAi)沉默HIF-2α表达对低氧下接种乳腺球细胞的裸鼠移植瘤生长的影响.方法 将慢病毒介导HIF-2α基因RNAi载体质粒和空载体质粒转染至MCF-7细胞株,G418筛选获得稳定转染细胞株.将空载体组及干扰组MCF-7细胞注射接种至裸鼠左右侧背部近后肢皮下,比较成瘤时间,肿瘤体积及瘤体重量等;Western印迹检测移植瘤组织中HIF-2α、CD44、OCT-4及KLF-4蛋白表达.结果 成功构建HIF-2P基因RNAi慢病毒载体,沉默HIF-2P表达降低乳腺球的形成;与空载体组比较,干扰组移植瘤生长速率、肿瘤体积和重量均明显降低(P<0.05).Western印迹显示干扰组HIF-2α蛋白表达量(0.42±0.01)明显低于空载体组(0.89 ±0.03,P<0.05),CD44蛋白表达量(0.21±0.01)明显低于空载体组(0.78 ±0.03,P<0.05),OCT-4蛋白表达量(0.13±0.01)明显低于空载体组(0.68±0.03,P<0.05),KLF-4蛋白表达量(0.34±0.01)明显低于空载体组(0.72±0.03,P<0.05).结论 RNAi沉默HIF-2α表达明显抑制低氧下乳腺球细胞裸鼠移植瘤生长,其机制可能通过下调干细胞标志物表达抑制乳腺癌细胞自我更新和增殖,HIF-2α有望成为乳腺癌基因治疗新的靶点.

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作者: 屈洪波 [1] 范原铭 [1] 韩明利 [1] 曾妮 [1] 朱之坤 [1] 刘红 [1] 谢佳 [1] 吴诚义 [1] 汤为学 [2]
期刊: 《中华医学杂志》2013年93卷15期 1182-1187页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
栏目名称: 基础研究
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2013.15.017
发布时间: 2013-05-31
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