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烧冲复合伤早期大鼠肺组织蛋白质组学比较

Comparative proteomics study on lung tissue in early stage of burn-blast combined injury in rats

摘要:

目的 比较烧冲复合伤早期大鼠肺组织蛋白质组学表达差异.方法 采用清洁级SD大鼠18只,用随机数表法分为烧冲复合伤组和单纯冲击伤组各9只.于致伤后6h,提取左侧肺组织蛋白.运用差异蛋白质组学方法,对两组肺组织蛋白提取物分别进行双向凝胶电泳(2-DE).使用PD Quest图像分析,找出差异表达的蛋白,并进一步进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析,结合生物信息检索,确定烧冲复合伤早期大鼠急性肺损伤发生时差异表达的蛋白.同时观察大鼠伤后6h肺组织病理改变.结果 去除实验中的死亡损耗后,最终每组均衡纳入8只大鼠进行统计学分析.2-DE凝胶结果显示,单纯冲击伤组肺组织得到736±47个蛋白点,烧冲复合伤组肺组织凝胶上共得到782±30个蛋白点,配比率为91%.PD Quest图像分析结果,有显著差异改变的蛋白点14个,其中烧冲复合伤组有10个点丰度显著增高(变化2倍以上),4个点丰度显著降低(变化2倍以上).进一步行MALDI-TOF-MS分析,将得到的肽质量指纹峰谱(PMF)经过蛋白质数据库检索比对,得到12个有意义的蛋白质:参与应激反应的热休克蛋白27/70、参与代谢与免疫反应的碳酸甘酶2、细胞色素c氧化酶、ATP合成酶、Ca2+转运酶、参与细胞骨架的肌动蛋白结合蛋白2蛋白等.结论 烧冲复合伤早期肺组织即出现了显著的蛋白质组学差异表达,其机制可能涉及与氧化应激、能量代谢变化、免疫应答反应、细胞骨架变化等相关蛋白.

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