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PNPLA3对棕榈酸引起的肝细胞凋亡的影响

The influence of patatin-like phospholipase domain-containing protein 3 on palmitic acid-induced hepatocyte apoptosis

摘要:

目的 研究含patatin样磷脂酶域3(PNPLA3)对棕榈酸(PA)引起的肝细胞凋亡的影响及相关机制.方法 以人肝癌细胞株HepG2为研究对象,分为过表达空载体(NC)组,过表达野生型PNPLA3(PNPLA3WT)组以及过表达突变型PNPLA3(PNPLA3 I148M)组,PA处理24h,油红染色检测细胞内脂质沉积,原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,蛋白印迹法检测内质网应激及相关凋亡蛋白水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清溶血卵磷脂(LPC)水平.结果 PA处理24h后,3组细胞脂肪沉积差异无统计学意义(P>0.05).与NC组相比,PNPLA3WT和PNPLA3I148M组细胞凋亡率分别增加了2倍和3倍.内质网应激相关的蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)通路激活,免疫球蛋白结合蛋白(BIP)、p-PERK、p-eIF2α蛋白表达增加,内质网应激凋亡通路CCAAT增强子结合蛋白(CHOP)、线粒体凋亡通路相关蛋白p53上调凋亡因子(PUMA)、Bax、caspase-3表达增加,且PNPLA3I148M组增加更明显.PNPLA3WT和PNPLA3I148M组在PA干预前后细胞上清LPC水平分约别为NC组的5倍和1.5倍.结论 PNPLA3可能通过调节LPC的代谢继而激活内质网应激相关凋亡途径参与PA诱导的肝细胞凋亡.

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