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高通量apoE基因分型技术的建立及应用

A rapid and high throughput method for apoE genotyping

摘要:

目的建立一种准确、快速、高通量的apoE基因分型技术.方法从外周血样品提取基因组DNA,PCR扩增覆盖第112和158密码子的apoE基因片段;构建apoE基因片段重组质粒,并进行定点诱变,以得到3种等位基因型的对照样品;PCR产物消化处理,以除去残余的引物和dNTPs;进行模板指导的荧光染料标记终止碱基的掺入反应,应用荧光偏振检测仪分析荧光偏振值的变化;检测79例阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)患者和63名健康老年人的apoE基因型,分析基因型与AD易感性之间的关系.结果对分析结果进行测序验证,表明模板指导的荧光染料标记终止碱基掺入-荧光偏振检测技术分析结果与测序结果完全相符.AD组和健康对照组样品的基因分型结果提示apoE ε4等位基因是迟发型AD的危险因素.结论应用此技术进行apoE基因多态性的基因分型分析,具有准确、简易和高通量等优势,可以作为AD风险分析的一种新技术,也适于apoE基因与其他疾病相关性研究时的大规模基因筛查分析.

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作者: 张文红 [1] 白玉杰 [1] 王琰 [1] 李丁 [1] 阎小君 [1]
期刊: 《中华医学遗传学杂志》2005年22卷1期 61-64页 MEDLINEISTICPKUCSCDBPEMBase
分类号: R3
栏目名称: 技术与方法
DOI: 10.3760/j.issn:1003-9406.2005.01.015
发布时间: 2005-03-17
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