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臭氧氧化预处理在肾缺血再灌注损伤中对内皮型一氧化氮合酶表达的影响

Effects of ozone oxidative preconditioning on eNOS in rats with renal ischemia/reperfusion injury

摘要目的 观察臭氧氧化预处理对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用及其对内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响.方法 38只8周龄雄性Wistar大鼠按随机数字表法随机分为4组.(1)假手术组(n=8):仅切除右肾;(2)缺血再灌注组(n=10):切除右肾、游离左肾后夹闭左肾动、静脉45 min再开通;(3)臭氧氧化预处理组(n=10):与缺血再灌注组建模方法一致,但在建模前15 d起每天1次经直肠灌注法吹入氧气和臭氧的混合气体5~5.5 mL;(4)氧气预处理组(n=10):与臭氧氧化预处理组建模方法一致,但经直肠仅吹入氧气(13 mg/kg).建模后24 h检测各组大鼠血清肌酐、血尿素氮和血清一氧化氮浓度;48 h后采用免疫组织化学法和逆转录PCR法检测各组大鼠肾组织eNOS表达;蛋白质印迹法检测肾组织胞浆eNOS含量.结果 建模后24 h,缺血再灌注组大鼠血清肌酐为(117±20)μmol/L,血尿素氮为(32.8±7.6)mmol/L,血清一氧化氮为(58±12)μmol/L,均高于假手术组,差异有统计学意义(均P<0.05).臭氧氧化预处理组血清肌酐为(63±16)μmol/L,血尿素氮为(17.4±5.2)mmol/L,低于缺血再灌注组和氧气预处理组,差异有统计学意义(均P<0.05);血清一氧化氮为(84±14)μmol/L,均高于缺血再灌注组和氧气预处理组,差异有统计学意义(均P<0.05).臭氧氧化预处理组肾组织学Paller评分(41±6)低于缺血再灌注组(62±9),eNOS灰度值(163±15)高于缺血再灌注组(126±18),差异有统计学意义(均P<0.05).假手术组大鼠肾组织内有微量eNOS mRNA表达,缺血再灌注组、臭氧氧化预处理组和氧气预处理组eNOS mRNA表达增强,均高于假手术组(均P<0.05),臭氧氧化预处理组eNOS mRNA表达高于缺血再灌注组和氧气预处理组(均P<0.05).假手术组无明显eNOS蛋白表达,缺血再灌注组、臭氧氧化预处理组和氧气预处理组eNOS蛋白表达增强,均高于假手术组(均P<0.05),臭氧氧化预处理组eNOS蛋白表达高于缺血再灌注组和氧气预处理组(均P<0.05).结论 臭氧氧化预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤有保护作用,作用机制可能与其诱导eNOS合成增多、一氧化氮产生增多有关.

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DOI 10.3877/cma.j.issn.1647-3903.2013.02.004
发布时间 2013-11-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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