紫杉醇对人骨肉瘤细胞凋亡及对bcl-2、bax 基因表达的影响
Effect of Paclitaxel on Apoptosis and bcl-2,bax Gene Expression in Human Osteosarcoma Cell
目的 了解紫杉醇诱导人骨肉瘤细胞的凋亡效果,以及凋亡与bcl-2和bax表达之间的关系.方法 用不同浓度的紫杉醇作用于骨肉瘤细胞MG63.采用胎盼蓝染色法,于细胞记数板进行活细胞率检测计算.采用光镜和电子显微镜对细胞形态改变进行观测,采用原位缺口末端标记凋亡检测法(TUNEL)和流式细胞术(Annexin-V-FITC & PI)对细胞凋亡进行检测.采用免疫组织化学法对凋亡调节基因bcl-2和bax表达进行检测.结果 骨肉瘤活细胞率随着紫杉醇作用时间延长和浓度增高而降低.紫杉醇诱导骨肉瘤细胞MG63凋亡表现为典型的凋亡特征,包括:细胞形态学改变,细胞染色质浓聚,染色质新月形变,胞核碎裂等.TUNEL法检测到了细胞DNA片段的断裂.随着细胞凋亡的发生,开始出现G2/M期阻滞.紫杉醇可以降低凋亡相关基因bcl-2的表达和增加bax基因的表达.结论 紫杉醇可以通过时间依赖性和剂量依赖性方式,促使细胞G2/M期阻滞和抑制细胞有丝分裂,从而诱导人骨肉瘤细胞凋亡.这种凋亡可能受到凋亡相关基因bcl-2低表达和bax高表达的调控.
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