糖化血红蛋白的单克隆抗体制备及鉴定
Preparation and identification of monoclonal antibody against glycated hemoglobin
目的:采用杂交瘤技术制备糖化血红蛋白的单克隆抗体并对其进行鉴定,为开发糖化血红蛋白ELISA 试剂盒提供特异性材料。方法通过用顺丁烯二酰亚胺法制备免疫抗原,通过BALB/c小鼠进行多层次免疫,通过细胞培养融合,HAT培养基筛选杂交瘤细胞,使用G蛋白层析法、硫酸铵盐析法等对细胞进行纯化。单抗亚类鉴定采用小鼠单克隆抗体亚型鉴定试剂盒。结果通过细胞融合、培养、筛选、克隆等,最后筛选出1株能稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,命名为N5B4;细胞培养上清液体效价为1:5000,腹水效价为1:100万;通过标准曲线计算样品中人糖化血红蛋白的浓度为99.2%。结论经过筛选获得高特异性、高灵敏度的KET单克隆抗体细胞株。
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