豚鼠早期实验性近视眼视网膜色素上皮细胞前部及后极部TGF-β2表达变化的研究
Altered TGF-β2 expression in retinal pigment epithelial (RPE)cells from an experimentally-induced myopia guinea pig model
目的 研究豚鼠早期实验性近视眼视网膜色素上皮(RPE)细胞前部及后极部转化生长因子β2 (TGF-β2)的改变,探索近视的发病机制.方法 2周龄豚鼠30只随机分为A、B、C组,每组10只,再随机选取5只(10眼)正常2周龄豚鼠不作任何干预,作为正常对照眼.选取任意眼戴一10 DS凹透镜,分别饲养6天、15天、30天后除去镜片,验光及测眼轴长度确定近视形成后,采用细胞酶消化法培养豚鼠的前部及后极部RPE细胞,取3~6代RPE细胞进行免疫细胞化学、实时荧光定量PCR、western-blot蛋白印迹法检查前部及后极部RPE细胞TGF-β2及其mRNA、蛋白表达变化.结果 TGF-β2的表达定位于细胞浆和细胞核.实验组中前部RPE细胞于15天阳性表达率较高,30天阳性表达率最高;后极部RPE细胞于6天表达率开始较高,至15天阳性表达率最高,以后保持较高的阳性表达率,差异有显著性(P<0.05);SC组各组自身前部及后极部比较,差异无显著意义(P>0.05).结论 体外培养的豚鼠RPE细胞稳定表达TGF-β2、TGF-β2 mRNA及其蛋白.且前部RPE细胞于诱导15天开始阳性表达率较高;后极部RPE细胞于诱导6天开始阳性表达率较高.后极部RPE细胞较前部RPE细胞表达差异有显著性.
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