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兔骨髓间充质干细胞的分离培养及诱导分化

Isolated Culture and Induced Differentiation of The Rabbit Marrow Mesenchyme Stem Cells

摘要:

目的:分离培养兔骨髓间充质干细胞并成骨诱导分化.方法:从兔骨髓中分离培养原代MSCs并进行传代培养,绘制生长曲线.取第3代细胞进行成骨诱导分化,进行Vonkossa染色,碱性磷酸酶染色,碱性磷酸酶(ALP)活性测定,总蛋白检测,提取细胞总RNA及RT-PCR法检测Collagen I,osteocalcin及osteopontin基因表达情况.结果:MSCs贴壁生长,呈放射样、爆花样或漩涡样,可传20代以上.未经成骨诱导的MSCs不发生矿化沉积,而经成骨诱导分化后,细胞可发生显著的矿质沉积.未经成骨诱导的MSCs可微量表达Collagen I,但不表达osteocalcin和osteopontin,而经成骨诱导分化后,细胞表达Collagen I增强,并出现osteocalcin和osteopontin等成骨标志物的表达.结论:本实验成功分离培养MSCs并成骨诱导分化.

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作者: 全仁夫 [1] 汤样华 [1] 黄忠名 [1] 李伟 [1] 徐金渭 [1]
期刊: 《中医正骨》2010年22卷11期 15-18页 ISTIC
分类号: R6
DOI: 10.3969/j.issn.1001-6015.2010.11.005
发布时间: 2010-12-30
基金项目:
浙江省医学科研基金 杭州市科技发展计划项目
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