摘要目的 以鸡胆粉为基质,利用双酶联合转化鸡胆粉中的牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)得到牛磺熊去氧胆酸(TUDCA),为制备人工熊胆粉提供实验基础.方法 利用基因重组技术克隆表达不饱和梭菌ATCC27555的7α-,7β-羟基类固醇脱氢酶(7α-,7β-HSDH).将双酶联合使用,通过一步还原反应、一步氧化反应将基质中的TCDCA经过中间产物牛磺7-酮石胆酸(T-7-KLCA)原位转化为TUDCA.结果 7α-,7β-HSDH双酶通过两步耦合反应能够有效的将鸡胆粉中的TCDCA转化为TUDCA,TUDCA的收率为63.17%.产物中TUDCA的含量达35.36%,超过卫生部关于人工熊胆粉中TUDCA的含量不低于23%的标准.结论 经双酶联合转化鸡胆粉所得产物中胆汁酸主要成分与天然熊胆粉相似,或可作为熊胆粉的替代品,为人工熊胆粉的研制提供了思路.
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