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摘要目的:建立稳定高表达荧光素酶报告基因Luc的人食管癌细胞系,构建SCID小鼠皮下及原位移植模型,并采用活体成像技术监测该细胞系在SCID小鼠皮下及原位移植模型中生长及转移情况,成功建立一种新型人食管癌细胞系可视化原位移植SCID小鼠模型,为抗肿瘤药物的研发提供新的有效工具。<br>　　方法:<br>　　1、采用lipofectamine2000转染试剂盒将质粒pcDNA3.1/Luc转染人食管癌细胞系EC9706,经G418抗性筛选及有限稀释法获得可稳定高表达荧光素酶的单克隆细胞系,并通过细胞生长曲线、细胞侵袭性实验分析转染前后细胞的生物学特性有否改变;<br>　　2、构建SCID小鼠皮下移植模型:碘伏消毒小鼠皮肤,将2.0×106个细胞注射入小鼠左下腹部皮肤,根据肿块的生长速度,每周测量2-3次,用游标卡尺测量移植瘤的长短径;<br>　　3、构建SCID小鼠原位移植模型:麻醉小鼠后碘伏消毒小鼠腹部皮肤,在小鼠腹正中做一长约1cm纵行切口,暴露胃组织,将其向下牵拉见下段食管,将约2.0～4.0×105个细胞注射入下段食管外膜下,生物胶封闭针眼,利用活体发光系统监测移植肿瘤细胞在体内生长及转移情况,3周后解剖小鼠,对皮下肿物、食管原位移植瘤及转移瘤进行HE染色,将病理学结果与荧光成像的结果进行对比。<br>　　结果:<br>　　1、构建了稳定高表达荧光素酶基因的单克隆细胞系EC9706-Luc,该单克隆细胞系具有与亲本细胞系相似的生物学特性,即细胞形态、生长方式及生长速度均与未转染细胞无明显差异;<br>　　2、将单克隆细胞系植入小鼠皮下及食管外膜下,采用活体成像技术准确监测肿瘤细胞体内生长及转移,其中建立食管原位移植模型4例,2例感染死亡,2例成功建立食管原位移植瘤,监测到肿瘤细胞发光;<br>　　3、皮下移植瘤以及食管原位移植瘤进行HE染色后提示皮下移植瘤、食管原位移植瘤均符合鳞状细胞癌特征,证实了活体成像的结果。<br>　　结论:<br>　　1、利用pcDNA3.1/Luc质粒转染食管癌EC9706细胞可以获得稳定表达荧光素酶的细胞系;<br>　　2、外源基因pcDNA3.1/Luc的转入并未对食管癌EC9706细胞的生长和侵袭性产生影响;<br>　　3、利用EC9706-Luc细胞系对SCID小鼠进行皮下及原位移植,可成功建立食管癌可视化SCID小鼠皮下及原位移植模型;<br>　　4、采用活体成像技术构建的原位移植动物模型是拓展肿瘤体内生长及治疗、药物研发相关研究的理想模型。