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摘要本文主要从以下几个部分展开论述：<br>　　第1部分 丝氨酸蛋白酶抑制剂HAI-1及其抑制靶标Matriptase的功能和结构研究<br>　　丝氨酸蛋白酶种类繁多，在人体内参与了多项重要的生理功能。肝细胞生长因子激活物抑制剂1(HAI-1)可抑制HGFA，Matriptase和Hepsin等酶的活性，与多种肿瘤的进程有关。HAI-1拥有两个能有效结合并抑制丝氨酸蛋白酶活性的Kunitz结构域（K1和K2），尤其是K1结构域起了主要作用。<br>　　在本论文的研究中，我们将HAI-1的K1结构域和人血清白蛋白HSA构建成融合蛋白HAI-1K1-HSA，并利用其对光敏剂单羧基取代酞菁锌CPZ进行分子包裹，以维持CPZ在水溶液中的良好单分散性。通过细胞实验，验证了HAI-1K1-HSA可以作为靶向性药物载体，将药物CPZ靶向运输至肿瘤细胞表面，从而对肿瘤细胞的侵袭抑制和光动力治疗杀伤有着较好的效果。<br>　　此外，我们进行了HAI-1抑制靶标Matriptase的自激活机制研究。我们利用果蝇S2细胞表达系统制备了大量的多结构域Matriptase酶原形式无活性突变体和成熟的全长HAI-1;利用毕赤酵母X33表达系统及后续的酶切，获得高活性的Matriptase催化结构域，可以在水溶液中快速将酶原Matriptase单体切割成两条链。此外，我们发现在溶液中酶原Matriptase会形成二聚体，这有可能是酶原Matriptase在自我激活前的一个相互作用形态。这些结果为进一步探索Matriptase自我激活的和HAI-1各个结构域调控Matriptase激活的机制提供了线索。<br>　　第2部分 丝氨酸蛋白酶底物受体C4.4A蛋白的晶体结构研究<br>　　Ly6/uPAR/α-neurotoxin结构域（LU结构域）是一种含有4-5对保守的二硫键且外观类似一个拥有三个手指的手掌的结构域，也被称为三指蛋白结构域。在哺乳动物中，它们通常在胞外空间作为蛋白受体行使功能。拥有该结构域的蛋白家族中，大多数成员只含有单个LU结构域，通常也只有在特殊细胞系或分化阶段才有表达。在本论文的研究中，我们成功获得了首个含有两个LU结构域的人源C4.4A单体，以及其与抗C4.4A单克隆抗体Fab片段的复合物晶体结构。结构显示，不同于常规同源家族蛋白的灵活结构，C4.4A的两个LU结构域以一种新的面对面的紧凑方式组装，同时C4.4A与抗体的相互作用需要两个结构域的共同参与。我们的结构提供了C4.4A与配体结合的一个潜在功能位点，为进一步认识三指蛋白家族的结构和功能提供了依据。