换一批
换一批弓形虫14-3-3信号转导蛋白基因亚克隆及鉴定
Subcloning and identification of 14-3-3 signal transduction protein gene of toxoplasma gondii
摘要目的将弓形虫14-3-3(Toxo14-3-3)信号转导蛋白基因亚克隆入表达载体pBK-CMV，用于寻找弓形虫新的诊断和候选疫苗分子以及寄生虫-宿主相互作用等研究。方法根据Toxo14-3-3核苷酸序列设计并合成一对引物，以弓形虫速殖子mRNA为模板，RT-PCR法扩增Toxo14-3-3 DNA片段，通过TA连接将其克隆入pGEM-T载体、经测序证实序列完全正确。再将该目的基因亚克隆入表达载体pBK-CMV中，转化大肠杆菌XL1-blue，提取质粒，经双酶切法和以该质粒为模板PCR法证实。结果 Toxo14-3-3信号蛋白基因ORF含798 bp，编码265个氨基酸。结论获得表达质粒pBK-CMV/Toxo14-3-3阳性重组体，为原核和真核基因表达奠定了基础。
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栏目名称
基础医学研究
DOI
10.3969/j.issn.1000-1492.2001.01.003
发布时间
2004-01-08
基金项目
安徽医科大学校科研和教改项目
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