换一批
换一批TNF受体(P55)胞外区和IgGFc嵌合蛋白高效原核表达载体的构建
Construction of high efficiency prokaryotic expression vector of extra-cellular domain of TNFR and IgGFc chimeric protein
摘要目的构建TNF受体(P55)胞外区和IgGFc嵌合蛋白的高效原核表达载体. 方法以人心肌cDNA文库为模板,PCR扩增TNF受体(P55)胞外区全基因(sTNFR-ED),亚克隆入pGEM-T/IgGFc中构建pGEM-T/sTNFR-ED∶IgGFc重组子,然后以其为模板,在上游引物中引入原核细胞高频密码子,再次PCR扩增去信号肽TNF受体(P55)胞外区和IgGFc嵌合基因(TNFR-ED∶IgGFc),亚克隆入pUC19载体,经序列测定正确后克隆入原核表达载体pBV220中.结果成功构建了TNF受体(P55)胞外区和IgGFc嵌合蛋白高效原核表达载体,命名为pBV220/TNFR-ED∶IgGFc.结论 pBV220/TNFR-ED∶IgGFc表达载体的构建,为进一步表达TNF 受体(P55)胞外区和IgGFc嵌合蛋白及其在中和TNF毒副作用、治疗自身免疫性疾病中的作用机制研究奠定了基础.
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分类号
R392.11
栏目名称
基础医学研究
DOI
10.3969/j.issn.1000-1492.2002.02.003
发布时间
2004-01-08
基金项目
国家高技术研究发展计划(863计划)
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