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新式SOE PCR高效组装人单链抗体在高容量人天然噬菌体抗体库中的应用

Application of an improved efficient SOE PCR in assembling scFv genes during construction of large human antibody library

摘要:

目的探讨新式SOE PCR高效组装人单链抗体在高容量人天然噬菌体抗体库中的应用.方法通过引物设计的改变,将6种人VH基因和11种人VL基因利用两步法直接互相两两连接为人scFv基因,并且与传统的SOE法进行对比.scFv基因用于构建噬菌体单链抗体库. 结果新式SOE PCR法成功的将6种人VH基因和11种人VL基因连接成66种不同的人scFv基因,与传统的SOE PCR法相比,效率高且方法简便,经过约130次电转化后,抗体库的总库容为5.58×109.结论成功地改进了传统的SOE PCR方法,高效组装了66种不同的人scFv基因,提高了抗体库的多样性.

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