换一批
换一批A亚型人呼吸道合胞病毒G基因的克隆、真核表达
Cloning, eukaryotic expression of G gene of subgroup A human respiratory syncytial virus
摘要目的克隆A亚型人呼吸道合胞病毒(HRSV)G基因,构建G基因的真核表达载体,并进行表达和鉴定.方法自行设计引物,利用RT-PCR技术,从感染HRSV的HEp-2细胞中获得G基因片段,克隆到pGEM-T easy载体,经核酸序列分析,进一步亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),酶切鉴定后,脂质体法转染COS-7细胞,RT-PCR和Western blotting鉴定基因转录和蛋白表达.结果真核表达载体pcDNA3.1(+)G的限制性内切酶分析结果与预期一致,基因序列分析显示没有发生无义突变.转染COS-7细胞后,RT-PCR检测到G基因有转录,Western blotting分析观察到G蛋白特异性的表达条带.结论成功克隆A亚型HRSV G基因,并在真核细胞中获得表达.
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主题词
基因(Genes)蛋白质亚型(Protein Isoforms)呼吸道合胞体病毒, 人(Respiratory Syncytial Virus, Human)病毒(Viruses)人(Persons)
栏目名称
基础医学研究
DOI
10.3969/j.issn.1000-1492.2006.02.001
发布时间
2006-05-09
基金项目
中国科学院资助项目
安徽省自然科学基金
安徽省教育厅自然科学基金
安徽师范大学校科研和教改项目
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