换一批
换一批摘要目的 体外诱导扩增抗原特异性CD4+ CD25+ T细胞,测定其免疫抑制功能,验证其抗原特异性.方法 应用免疫磁珠法(MACS)分选C57BL/6鼠CD4+ CD25+ T细胞.CD4+ CD25+ T细胞在Balb/c鼠抗原刺激条件下,体外扩增获得Balb/c鼠抗原特异性的CD4+ CD25+ T细胞(iCD4+ CD25+ T),流式细胞术测定其纯度, RT-PCR方法测定其FoxP3mRNA.测定在Balb/c小鼠(A组)或昆明鼠(B组)抗原刺激条件下,iCD4+ CD25+ T抑制T细胞增殖的效率,验证iCD4+ CD25+ T的抗原特异性.ELISA法测定A、B组上清液中IL-10和TGF-β的含量.结果 MACS分离的C57BL/6小鼠CD4+ CD25+ T细胞纯度为99.6%.扩增3周,iCD4+ CD25+ T纯度达85%,扩增数目达900倍,高表达Foxp3基因.当iCD4+ CD25+ T ∶ CD4+ CD25- T为1 ∶ 1、1 ∶ 2时,A组抑制率明显高于B组(82.2%±3.29% vs 11.6%±1.2%,54.4%±3.5% vs 5.4%±1.7% ,P＜0.01).A组IL-10和TGF-β的分泌量均高于B组(P＜0.01).结论 在体外成功诱导扩增了具有免疫抑制功能的抗原特异性的CD4+CD25+调节性T细胞.
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