换一批
换一批摘要目的 克隆人白细胞介素(IL)15全长cDNA,并在大肠杆菌中表达.方法 从人外周血分离的淋巴细胞中提取总RNA,通过RT-PCR扩增出hIL-15全长cDNA.构建到原核表达载体pET28a(+)中,通过卡那霉素平板筛选及PCR鉴定,挑出阳性克隆进行扩增,DNA测序正确后,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,扩增后IPTG诱导表达.通过SDS-PAEG及Western-blot方法鉴定表达的融合蛋白.结果 成功构建人IL-15表达载体,并表达于大肠杆菌中.SDS-PAEG及Western-blot分析显示表达的融合蛋白分子量为16.1 ku,与理论值相符.结论 获得了hIL-15融合蛋白,为hIL-15单克隆抗体的制备及其功能研究奠定了基础.
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