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转化生长因子-β1对大鼠肌成纤维细胞增殖及胞内Smad蛋白磷酸化的影响

The effects of transforming growth factor β1 on the proliferation and Smad proteins phosphorylation in rat myofibroblast

摘要目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对大鼠肌成纤维细胞(MFB)增殖及胞内Smad蛋白磷酸化的影响.方法 TGF-β1(0.33~81 pmol/L)在不同作用时间(5~120min)的条件下诱导MFB细胞活化,采用免疫吸附和Western blot方法观察TGF-β1对MFB细胞内pSmad2C、pSmad2L、pSmad3L及Smad2/3蛋白表达的影响;采用MTT方法观察TGF-β1对MFB细胞增殖的影响.结果 在0.33~9 pmol/L浓度范围内,TGF-β1均呈浓度依赖性刺激MFB细胞内Smad2C、Smad2L、Smad3L磷酸化,以9 pmol/L最明显,TGF-β1在27、81 pmol/L浓度时,Smad2C、Smad2L、Smad3L磷酸化仍处于高水平状态,而各组Smad2/3蛋白表达无明显变化.在TGF-β1为9 pmol/L浓度条件下,30~60 min孵育时间对MFB细胞增殖无明显影响,但可呈时间依赖性刺激MFB细胞内Smad2C、Smad2L、Smad3L磷酸化,以30 min最明显,TGF-β1在60、120 min时间时,Smad2C、Smad2L、Smad3L磷酸化仍处于高水平状态,而各组Smad2/3蛋白表达量无明显变化.结论 TGF-β1诱导MFB细胞内Smads磷酸化先于刺激细胞增殖.

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