换一批重组质粒pSecTag2/B-OPG在Beagle犬骨髓基质细胞中表达与鉴定
Expression and identification of recombinant plasmid of pSecTag2 /B-OPG in Beagle dog bone marrow stromal cells in vitro
摘要目的 转染骨保护素(OPG)基因至Beagle犬骨髓基质细胞(BMSCs)中,并检测其表达能力,为基因工程技术治疗牙周病提供物质基础.方法 穿刺抽取成年Beagle犬骨髓2～3 ml,通过全骨髓贴壁法获取BMSCs.传代至第3代,脂质体瞬时转染经鉴定的重组pSecTag2/B-OPG,并用RT-PCR、Western blot检测OPG的表达水平.结果 重组质粒pSecTag2/B-OPG经Hind Ⅲ单酶切及EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ双酶切,电泳显示切下的片段均与预期大小相符,经测序证实此基因与GenBank中提供的序列[gi:33873056]一致;RTPCR、Western blot结果显示:重组pSecTag2/B-OPG在骨髓基质细胞中有表达.结论 成功建立了OPG基因修饰的骨髓基质细胞瞬时基因表达体系.
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DOI
10.3969/j.issn.1000-1492.2007.02.006
发布时间
2007-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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