靶向Her2基因SiRNA对人卵巢癌细胞株SKOV-3 顺铂敏感性的影响
The effects of siRNA specific for Her-2 gene on the cisplatin sensitivity of ovarian carcinoma cell line
目的 通过siRNA沉默Her2基因的表达探讨其对卵巢癌细胞株SKOV-3顺铂(DDP)敏感性的影响.方法 靶向Her2的siRNA通过阳离子脂质体介导转染到SKOV-3中,经过嘌呤霉素筛选得到稳定抑制Her2基因表达的SKOV-3细胞株,通过RT-PCR方法检测各组SKOV-3细胞Her2基因的表达.应用四甲基偶氮唑蓝检测DDP对各组SKOV-3细胞增殖水平的影响,应用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素细胞凋亡试剂盒在流式细胞仪上检测DDP作用后各组SKOV-3细胞凋亡水平.结果 建立了稳定抑制Her2基因表达的细胞株,SKOV3/siRNA-1组和SKOV3/siRNA-2组细胞Her2基因表达分别为对照组的53.8%和38.4%,而空载体组为92.3%.在DDP作用下SKOV3/siRNA-1和SKOV3/siRNA-2的细胞存活率在4 d时分别为67.7%±4.4%和66.4%±3.3%,与未转染对照组81.7%±1.3%和空载体组81.3%±1.4%比较差异有显著性(P<0.05).FCM分析显示SKOV3/siRNA-1和SKOV3/siRNA-2细胞的DDP诱导凋亡率分别为38.6%±1.1%和42.8%±1.4%,明显高于未转染组9.1%±O.8%和空载体组8.8%±0.7%,差异有显著性(P<0.05).结论 靶向Her2基因的siRNA可以增强卵巢癌细胞株SKOV-3对DDP的敏感性.
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