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重组Endocan转染MDCK细胞对其表达骨桥蛋白的影响

The transfection of recombinant Endocan to MDCK cells and influence on OPN

摘要目的 构建Endocan真核表达载体pcDNA3.1-Endocan,转染犬肾小管上皮细胞MDCK,观察其在MDCK中的表达并初步分析其对骨桥蛋白(OPN)表达的影响.方法 应用PCR从pET 28-Endocan中扩增出Endocan cDNA全长序列,酶切后导人pcDNA 3.1/myc-his A多克隆位点,构建真核表达载体pcDNA 3.1-Endocan;瞬时转染MDCK细胞,Western blot检测Endocan和OPN表达.结果 经双酶切鉴定及测序分析表明Endocan已经克隆到pcDNA 3.1/myc-hisA中.Western blot结果表明转染成功,Endocan表达量增加,且OPN随其而增加.结论 Endocan可促进MDCK表达OPN.

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