换一批
换一批pFLAG-CMV-TRAF1真核表达载体的构建及其对NF-κB信号通路的影响
Construction of the pFLAG-CMV-TRAF1 eukaryotic expression vector and its inhibitory influence of NF-κB
摘要目的 构建人TRAF1真核表达载体,应用荧光素酶报告基因实验研究TRAF1对NF-κB报告基因活性的影响.方法 采用PCR技术扩增出TRAF1编码基因,将其构到真核表达载体pFlag-CMV-2上.用脂质体将构建的真核表达载体瞬时转染HEK293细胞,用Western blot检测TRAF1蛋白是否表达.用荧光素酶报告基因实验验证其对NF-κB转录活性的影响.结果 成功克降TRAF1编码基因至相应表达载体上.构建的TRAF1真核表达载体使HEK293细胞高表达TRAF1蛋白;在肿瘤坏死因子(TNF-α)的刺激下可以抑制NF-κB的转录活性.结论 TRAF1负调控NF-κB的活性,为进一步研究TRAF1的功能提供了线索.
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栏目名称
基础医学研究
DOI
10.3969/j.issn.1000-1492.2009.02.002
发布时间
2009-06-16
基金项目
国家自然科学基金创新研究群体基金
国家高技术研究发展计划(863计划)
国家重点基础研究发展规划(973计划)
安徽省人才开发基金
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