猪囊尾蚴cC1蛋白的原核表达及其特异性鸡卵黄抗体的制备与鉴定
Preparation and identification of egg yolk immunoglobulin against cysticercus cellulosae cC1 protein expressed in E.coli
摘要目的 制备并鉴定特异性抗猪囊尾蚴鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),为猪囊尾蚴病的免疫学诊断提供新的途径.方法 原核表达猪囊尾蚴抗原cC1蛋白,纯化后经皮下和肌肉多点注射免疫25周产蛋海兰母鸡,200 μg/只,首次免疫28 d后加强免疫3次,每次间隔10 d.ELISA法检测IgY抗体效价,Akita法和EGGstractTM IgY Purification System纯化试剂盒分别提取纯化鸡卵黄抗体,考马斯亮蓝法测定抗体含量,Western blot检测抗体特异性.结果 cC1蛋白能有效刺激海兰母鸡产生抗体,首次免疫后第5天左右出现抗体,免疫后第55天为高峰,效价高达1:105以上,表明制备的鸡卵黄抗体IgY具有较强免疫特异性.结论 纯化的猪囊尾蚴cC1蛋白免疫海兰母鸡能产生高效价、特异性的IgY,为进一步研究猪囊尾蚴病的免疫学诊断奠定了实验基础.
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