换一批
换一批表达荧光素酶报告基因稳定细胞系的建立及对CBLB502活性的检测
Establishment of stable cell line expressing NF-κB luciferase reporter gene and activity detection of CBLB502 protein
摘要目的 建立表达NF-κB-RE-luc2P荧光素酶报告基因的稳定细胞系以检测CBLB502的活性.方法 利用脂质体转染试剂Lipofectin2000将含有NF-κB报告基因的质粒NF-κB-RE-luc2P转染入人胚肾细胞(HEK293细胞),并通过潮霉素B进行克隆筛选,最后挑取单克隆进行放大并应用荧光素酶检测方法进行鉴定.结果 经200 μg/ml的潮霉素B筛选,得到所需要的单克隆株,鉴定并保存.应用该潮霉素抗性单克隆细胞系对基于NF-κB信号通路的新型抗辐射蛋白药物CBLB502活性的检测显示出良好的量效关系.结论 本实验通过Lipofectin2000转染法并在潮霉B筛选成功培育出稳定表达NF-κB报告基因活性的HEK293细胞系.
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DOI
10.3969/j.issn.1000-1492.2011.04.003
发布时间
2011-05-04
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