换一批
换一批日本血吸虫P14钙结合蛋白样蛋白基因真核表达载体的构建、表达和鉴定
Construction,expression and identification of the eukaryotic expression vector carring Schistosoma japonicum P14 gene
摘要目的 从日本血吸虫成虫cDNA中扩增出钙结合蛋白样蛋白SjP14编码基因,并亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),制备重组分子疫苗.方法 提取日本血吸虫成虫总RNA,逆转录cDNA,设计引物常规PCR法扩增出SjP14编码基因,通过线性T克隆载体pGEM-T连接,亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),经转染至Hela细胞中表达,表达产物经Western blot鉴定.结果 PCR扩增产物与预期大小相一致,pGEM-T-SjP14及pcDNA3.1(+)-SjP14分别经双酶切后均获得一特异性基因片段,表达产物经Western blot鉴定分子量约为38ku.结论 成功构建了日本血吸虫钙结合蛋白样蛋白真核表达载体,并获得了表达产物.
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DOI
10.3969/j.issn.1000-1492.2011.04.005
发布时间
2011-05-04
基金项目
国家自然科学基金
安徽省自然科学基金
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