换一批pEGFP-N2-ECM1重组质粒的构建及其在人肝癌细胞系SMMC-7721中的表达
Construction of ECM1 in eukaryotic expression vector and its expression in hepatocellular carcinoma cell line SMMC-7721
摘要目的 构建细胞外基质蛋白-1(ECM1)稳定表达的SMMC-7721肝癌细胞系.方法 应用PCR和DNA重组技术构建pEGFP-N2-ECM1真核表达载体,经酶切、测序鉴定正确后,用脂质体转染SMMC-7721细胞,G418药物筛选稳定转染的细胞系.荧光显微镜检测融合蛋白表达,RT-PCR技术检测ECM1基因表达.结果 构建的重组质粒经双酶切及测序分析鉴定,结果 证实pEGFP-N2-ECM1构建成功;筛选获得稳定表达ECM1的SMMC-7721细胞.结论 成功构建了pEGFP-N2-ECM1的真核表达载体,并在肝癌SMMC-7721细胞中稳定表达,为研究ECM1在肝癌进展中的作用奠定了实验基础.
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DOI
10.3969/j.issn.1000-1492.2012.02.007
发布时间
2012-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
安徽高校省级自然科学研究重点项目（KJ2011A171）；
安徽省"115"产业创新团队-肝细胞癌转移复发研究团队资助项目
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