应用免疫磁珠分离法纯化弓形虫速殖子的研究

Immunomagnetic separation for purification of Toxoplasma gondii tachyzoites

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摘要目的用免疫磁珠分离法分选弓形虫速殖子，以去除宿主细胞成分，并尽可能对虫体的生物学特性无不良影响，为弓形虫的基础与临床研究提供技术基础。方法采用弓形虫Wh3株( China 1基因型)速殖子感染小鼠，提取腹腔液，常规方法制备速殖子可溶性抗原，免疫家兔，获得兔抗弓形虫多克隆IgG抗体。用抗体包被的免疫磁珠对小鼠腹腔液内弓形虫速殖子进行纯化，比较其纯度、回收率、虫体活力、毒力与感染性。结果用免疫磁珠分离技术纯化弓形虫速殖子后，其纯度提高到98.2%，细胞清除率为96%，虫体回收率为73.5%；用内盐法( MTS )细胞增殖与毒性检测试剂盒检测分离后的速殖子活性为95.6%。定量分组感染小鼠后死亡时间无显著性差异。结论免疫磁珠分离的速殖子纯度、细胞清除率和虫体回收率较高，能有效去除宿主细胞，且对速殖子的活性和毒力无影响。该法操作简便快速，无需昂贵的仪器设备，具有较大的实用价值。