换一批
换一批Gardiquimod对HepG2细胞中VEGF和TIMP1表达的影响
Effects of Garquimod on the expression of VEGF and TIMP1 in HepG2 cells
摘要目的研究Toll样受体7(TLR7)的配体Gardiquimod对HepG2细胞中血管内皮生长因子( VEGF)和基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1) mRNA表达的影响,并分析其激活的信号通路。方法HepG2细胞经不同时间的Gardiquimod(2μg/ml)处理后,提取细胞总 RNA 和总蛋白, RT-PCR 分析VEGF和TIMP1转录水平的变化；Western blot分析丝裂原蛋白激活激酶-胞外信号调节激酶( MAPKs-ERK1/2)信号通路,并通过MAPKs-ERK1/2特异性阻断剂PD98059阻断相应的信号途径,进而分析两者的相关性。结果HepG2细胞中表达 TLR7,但较外周血单个核细胞( PBMC )较少。Gardiquimod刺激HepG210 min后下调细胞中VEGF mRNA的表达,而刺激细胞30 min后TIMP1 mRNA的表达有明显的上调；Western blot结果显示,细胞中的ERK1/2的磷酸化水平明显降低；并且ERK1/2的特异性抑制剂( PD98059)能有效抑制HepG2细胞中ERK1/2磷酸化作用。结论TLR7激活能够下调HepG2细胞中VEGF的表达,并与ERK1/2信号通路相关；同时 TLR7激活上调 TIMP1的表达,但与ERK1/2信号通路无相关性。
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