靶向抑制 DNMT1对人脑胶质瘤细胞增殖的影响
The effect of targeting inhibition of DNMT1 gene on the proliferation of human glioma cell
摘要目的:应用靶向 DNA 甲基转移酶1(DNMT1)基因的小干扰 RNA(siRNA)重组质粒来转染体外培养的人脑胶质瘤细胞,观察其对胶质瘤细胞增殖活性的影响。方法实验组予以 siRNA-DNMT1序列进行转染,对照组仅予以 siRNA-阴性对照序列。应用 qRT-PCR 分析 DNMT1基因表达变化, Western blot 法分析 DNMT1、PCNA 和 Cyclin D1蛋白表达变化,MTT 法检测细胞增殖生长能力,细胞克隆法分析细胞增殖克隆形成能力。结果与对照组比较,qRT-PCR 结果表明实验组 DNMT1 mRNA 表达明显减少( P <0.01);Western blot 法表明实验组 DNMT1、PCNA 和 Cyclin D1蛋白表达水平明显降低(P <0.01);MTT 法检测表明实验组中活细胞数明显低于对照组(P <0.05);细胞克隆法表明实验组细胞的增殖克隆形成能力明显低于对照组( P <0.01)。结论靶向 DNMT1基因的 siRNA 重组质粒可减少人脑胶质瘤细胞内 DNMT1基因的表达,从而抑制胶质瘤细胞的增殖。
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