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结核分枝杆菌特异性蛋白片段Rv3388和6种特异抗原在结核抗体检测中的应用价值

Assessment of the detection effect of specific protein fragment of Rv3388 and six kinds of antigens in tuberculosis antibody response

摘要目的 对结核分枝杆菌( MTB) PE家族的所有成员的结构进行分析,预测其抗原表位,截取Rv3388蛋白的优势抗原片段,对重组Rv3388蛋白及其它6种MTB特异性抗原进行评估,探讨不同结核特异性抗原与血清抗体的反应模式,评价血清学检测在结核病诊断中的价值. 方法 利用基因合成技术重叠延伸PCR扩增Rv3388蛋白637~731位的编码基因片段, 原核表达并纯化重组蛋白pET32a/Rv3388637-731 ,将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA法对该抗血清进行免疫原性分析. 同时对这7种MTB特异性蛋白的特异性及敏感性进行评价. 结果 重组蛋白pET32a/Rv3388637-731在大肠杆菌中的表达量占全菌蛋白的80%,ELISA显示有较强的免疫原性. 7 种 MTB特异性抗原具有不同的反应模式,单个抗原检测敏感性较差. 结论 对MTB PE家族的蛋白结构分析,表达并纯化重组蛋白pET32a/ Rv3388637-731 ,7种蛋白在血清抗体检测中具有抗原互补性,不同抗原与机体反应存在不同反应模式,提高结核抗体检测敏感性应多种抗原联合检测.

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作者 周鹏 [1] 丁莹莹 [2] 林子玉 [1] 冯娇娇 [2] 高彩霞 [2] 王锦红 [2] 杨华 [1] 温宗梅 [1] 潘卫 [2] 邓松华 [3] 学术成果认领
作者单位 安徽医科大学病理生理学教研室,合肥,230032 [1] 第二军医大学病原生物学教研室,上海,200433 [2] 安徽医科大学病理生理学教研室,合肥 230032;安庆医药高等专科学校,安庆 246052 [3]
分类号 R392.1
栏目名称 基础医学研究
发布时间 2015-10-13
基金项目
国家高技术研究发展计划 ( 863 计划) 国家自然科学基金项目
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