慢病毒介导的 FoxA1高表达对乳腺癌 MCF-7细胞株增殖凋亡探究
Overexpression of FoxA1 by an adenoviral vector and its effects on cell cycle and apoptosis in MCF-7 human breast cancer cells
摘要目的:利用慢病毒载体,构建乳腺癌MCF-7高表达FoxA1细胞株,并初步探究FoxA1对乳腺癌MCF-7细胞株增殖凋亡的影响。方法将FoxA1基因重组构建慢病毒载体穿梭质粒EX-Z1010-LV201,经PCR和测序后在脂质体Lipo-fectamine2000介导下转染293T细胞包装慢病毒,嘌呤霉素筛选出稳定转染的细胞, Real-Time PCR 法检测稳定转染MCF-7细胞株中FoxA1基因的表达水平, MTT及流式细胞术对比高表达FoxA1细胞株与对照细胞株增殖凋亡差异。结果 PCR扩增和测序结果证实成功构建FoxA1慢病毒载体并包装慢病毒,成功筛选出FoxA1高表达的乳腺癌MCF-7细胞系。 MTT及流式细胞术结果显示:与对照组比较,上调FoxA1乳腺癌MCF-7细胞株增殖下降,凋亡率增加。结论成功构建了重组慢病毒载体,并筛选出稳定高表达FoxA1的MCF-7细胞株,FoxA1可能参与了乳腺癌MCF-7细胞株增殖凋亡调控,为下一步进行其机制探讨提供了依据。
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