换一批
换一批Shp2表达沉默对ATPR诱导K562细胞分化作用的影响
Effect of Shp2 gene silencing on the 4-amino-2-trifluoromethyl-phenyl retinate inducing differentiation of K562 cells
摘要目的 研究4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(AT-PR)在诱导慢性粒细胞白血病K562细胞分化过程中蛋白酪氨酸磷酸酶(Shp2)的作用.方法 ATPR作用K562细胞,CCK-8法检测细胞生长抑制率;Q-PCR和Western blot法检测Shp2表达;合成特异性荧光短链Shp2 siRNA链,抑制Shp2表达后,观察ATPR对K562细胞增殖和形态学影响.流式细胞术测定周期动力学和特异性分化指标CD235a表达,利用Western blot和Q-PCR法检测维甲酸受体RARs蛋白和mRNA的表达.结果 ATPR(10-5 mol/L)作用于K562细胞72 h时能最显著地抑制增殖,且Shp2的表达明显下降.靶向沉默K562细胞中Shp2基因的最佳序列为PT-PN-Homo-438,siRNA与Lipo的最佳浓度比例为1∶0.05.与ATPR单独用药组比较,siRNA-Shp2+ ATPR组的K562细胞增殖活性升高,G0/G1期细胞所占比例降低,S期增多,CD235a的表达下降,形态学较空白组变化不大.Shp2转染沉默后用药组维甲酸受体RARs表达与单独用药组比较有差异.结论 Shp2沉默后,ATPR诱导K562细胞分化作用减弱,提示ATPR诱导K562细胞分化过程中,Shp2可能发挥着作用.
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关键词
4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯蛋白酪氨酸磷酸酶K562细胞诱导分化维甲酸受体4-amino-2-trifluoromethyl-phenyl retinateShp2K562 cellsinducing differentiationretinoic acid receptor
栏目名称
基础医学研究
DOI
10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.10.003
发布时间
2016-10-21
基金项目
国家科技部“重大新药创新”科技重大专项
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