16型人乳头瘤病毒E5基因对永生化口腔上皮细胞EGFR、p21、p53和Rb基因表达的影响

Effects of human papillomavirus E5 gene on EGFR, p21, p53 and Rb gene expression in immortalized oral epithelial cells

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摘要目的分析16型人乳头瘤病毒E5基因(HPV 16 E5)对永生化口腔上皮细胞(HIOEC)肿瘤相关基因表皮生长因子受体(EGFR)、p21、p53和Rb表达的影响,探究HPV16 E5在口腔鳞状细胞癌发生发展过程中的潜在作用机制.方法将含有目的基因HPV16 E5的慢病毒载体pLOV-E5及对照病毒载体pLOV-N分别转染HIOEC细胞,并筛选出各自稳定转染的细胞株.RT-qPCR和Western blot法分别检测EGFR、p21、p53和Rb基因mRNA和蛋白表达水平的变化.MTT法分析HPV 16 E5对HIOEC细胞增殖活性的影响.结果 pLOV-E5转染的HIOEC细胞中,p21和p53的mRNA转录水平较对照组显著提高(P=0.00、0.02),但EGFR的mR-NA转录水平较对照组无明显变化;EGFR、p21和p53的蛋白表达水平较对照组均显著提高,Rb基因的mRNA和蛋白表达水平较对照组均无明显变化.MTT法检测结果表明,pLOV-E5转染HIOEC的增殖活力较对照组显著提高(P=0.00).结论 HPV16 E5可以促进HIOEC的增殖,同时上调EGFR、p21和p53在HIOEC中的表达水平.