HIF-1α介导大鼠血管内皮细胞ET-1及其受体表达的机制研究

Hypoxia inducible factor-1 mediates the transactivation of endothelin-1 and its receptors in rat endothelial cells

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摘要目的探讨低氧诱导因子-1(HIF-1)在大鼠血管内皮细胞中介导内皮素-1(ET-1)及其受体表达的作用及机制.方法在大鼠内皮细胞中过表达或siRNA干扰HIF-1α的表达,过表达分为空白组、GV230组、GV230/HIF-1 α组,siRNA干扰分为空白组、shRNA-NC组、shRNA/HIF-1 α组.应用Real-time PCR、Western blot法检测HIF-1α、ET-1、ETA、ETB的mRNA和蛋白表达水平.采用2-△△Ct计算Real-time PCR的基因表达水平,采用GraphPad Prism 5.0软件对结果进行统计处理.采用Quantity one灰度分析软件分析Western blot的蛋白表达水平.应用单因素的方差分析比较多组之间均数的差异,各组之间的两两比较采用LSD法.结果与空白组和GV230组相比,GV230/HIF-1α组的细胞中ET-1、内皮素受体A (ETA)、内皮素受体B(ETB) mRNA和蛋白表达水平显著增高,差异有统计学意义(P＜0.05);与空白组和shRNA-NC组相比,shRNA/HIF-1α组的细胞中ET-1、ETA、ETB mRNA和蛋白表达水平显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).空白组和GV230组/shRNA-NC组的ET-1、ETA、ETB mRNA和蛋白表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 HIF-1α介导血管内皮细胞中ET-1及其受体表达,参与低氧条件下血管通透性变化.