换一批
换一批miR-182靶向调控FOXO3a表达对胶质瘤细胞增殖和侵袭能力的影响
Effects of FOXO3a expression by miR-182 targeted regulation on proliferation and invasion of glioma cells
摘要目的 探讨小分子核苷酸序列182(miR-182)靶向调控“叉头蛋白”的O亚家族(FOXO3a)蛋白表达对胶质瘤细胞U251增殖与侵袭能力的影响.方法 将无义序列与miR-182 micmics脂质体转染入U251细胞内,MTT法测定细胞的增殖数量,Transwell小室测定细胞的转移.荧光素酶报告实验检测miR-182对FOXO3a的靶向作用,应用Westernblot与qRT-PCR测定FOXO3a蛋白与mRNA的表达.将FOXO3a野生型与突变型质粒导入U251细胞,应用MTT与Transwell实验测定U251细胞的增殖与转移能力变化.结果 与对照组及无义序列组比较,在第1～3天,转染miR-182micmics脂质体组的细胞数显著增加(P＜0.05);第4～5天.miR-182 micmics脂质体组的细胞数呈减小趋势,较其他两组细胞数仍显著增加(P＜0.05).荧光素酶报告实验检测显示,共转染突变型pc DNA3/ EGFP(增强绿色荧光蛋白)-FOXO3a 3'-UTR(非翻译区)质粒和miR-182 mimics组细胞荧光素酶活性最低(P＜0.01).与对照组及无义序列组比较,miR-182 mimics组FOXO3a的蛋白及mRNA含量显著减少(P＜0.01).转染突变型FOXO3a脂质体的U251细胞,与野生型组比较,其细胞增殖数量与转移数量均显著减少(P＜0.05).结论 miR-182可促进胶质瘤U251细胞的增殖与转移,FOXO3a蛋白表达量的增加会造成胶质瘤U251细胞的增殖与转移能力降低,miR-182对FOXO3a起负性调控的作用.
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