miR-9-5p对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
Effects of miR-9-5p on proliferation, migration and invasion of prostate cancer cells
摘要目的 探讨miR-9-5p对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响和可能的分子机制.方法 利用荧光定量PCR检测正常前列腺上皮细胞RWPE-1、前列腺癌细胞PC3和DU145中miR-9-5p的表达水平.利用感染慢病毒的方式建立稳定过表达miR-9-5p的PC3细胞(PC3/miR-9-5p),使用荧光定量PCR进行鉴定.利用CCK-8法分析PC3/miR-9-5p细胞增殖能力的变化,通过Transwell迁移和侵袭试验分析PC3/miR-9-5p细胞迁移和侵袭能力的变化.利用生物信息学方法预测miR-9-5p的靶基因,并构建靶基因3’-UTR的野生型(WT)和突变型(Mut)荧光素酶报告基因质粒,通过荧光素酶报告基因法和荧光定量PCR验证预测结果是否正确.结果 正常前列腺上皮细胞RWPE-1中miR-9-5p的表达水平显著高于前列腺癌细胞PC3和DU145.在稳定过表达miR-9-5p的PC3/miR-9-5p细胞中miR-9-5p的表达水平显著高于PC3细胞(P<0.01)和对照组细胞(PC3/miR-NC)(P<0.01).细胞增殖能力检测显示,与PC3组(P<0.05)和PC3/miR-NC组(P<0.01)相比,PC3/miR-9-5p组在72 h和96 h时细胞活力显著降低.Transwell迁移和侵袭试验结果显示,PC3/miR-9-5p组与PC3组和PC3/miR-NC组相比,细胞迁移和侵袭能力显著下降(P<0.01).生物信息学预测显示,miR-9-5p能够靶向结合CXCR4的3'-UTR;双荧光素酶报告基因分析显示,miR-9-5p能够靶向作用于CXCR4的3'-UTR抑制萤光素酶表达;荧光定量PCR检测结果显示,在过表达miR-9-5p能够显著抑制PC3细胞中CXCR4的表达.结论 miR-9-5p能够抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,这可能是通过靶向抑制CXCR4的表达来实现的.
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