换一批IGF-1对兔脂肪干细胞增殖和成骨分化的影响
Effects of IGF-1 on the proliferation and osteogenic differentiation of rabbit adipose-derived stem cells
摘要目的 探讨胰岛素样生长因子(IGF-1)对兔脂肪干细胞(ADSCs)增殖和成骨分化的影响.方法 无菌条件下从兔颈后部取出脂肪组织,Ⅰ型胶原酶消化法将ADSCs从脂肪组织中分离,观察细胞生长.采用免疫荧光法检测ADSCs表面特异性标志物CD90.P3代ADSCs在成脂和成骨诱导培养液的诱导下向成脂和成骨方向分化,油红O、茜素红染色定性鉴定.在成骨诱导培养基中加入IGF-1,设置培养基IGF-1浓度为0、5、10、20 ng/ml四组,观察不同浓度IGF-1对ADSCs增殖活性、碱性磷酸酶(ALP)和钙离子含量的影响.CCK-8法检测各组ADSCs的增殖活性,茜素红染色定性检测各组ADSCs的成骨分化能力;通过测定ALP和钙离子含量定量检测各组ADSCs成骨分化能力.结果 原代及传代的兔ADSCs均呈长梭形或成纤维细胞样外观,生长分化活跃.免疫荧光检测ADSCs高度表达表面特异蛋白CD90,培养的细胞具有成骨分化和成脂分化的能力.IGF-1可以促进ADSCs增殖活性和提高ADSCs的ALP、钙离子含量.IGF-1浓度越高,ADSCs增殖活性和ALP、钙离子含量越高.结论 IGF-1可以促进兔ADSCs的增殖与成骨分化.
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