PI3K/Akt信号通路参与LPS诱导大鼠肺微血管内皮细胞表达RACK1及rac1

The PI3K/Akt signaling pathway involved in the expression of RACK1 and rac1 in the rat pulmonary microvascular endothelial cells induced by lipopolysaccharide

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摘要目的探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路对脂多糖(LPS)诱导大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)表达活化的蛋白激酶C受体1(RACK1)和ras相关C3肉毒菌毒物底物1(rac1)的影响.方法体外培养大鼠PMVEC:①LPS量效组:0、1、5、10 mg/LLPS与大鼠PMVEC孵育12 h;②LPS时效组:10 mg/LLPS与PMVEC孵育0、3、6、8、12、24 h;③IGF-1时效组:100ng/ml IGF-1与PMVEC孵育0、3、6、8、12、24h;④LPS+LY294002组:100 ng/ml LY294002预孵育PMVEC 1 h后加入10 mg/L LPS继续孵育12 h,设空白组、LPS组和LY294002组为对照.所有干预结束后Western blot法检测RACK1、rac1及p-Akt蛋白表达.结果 ①LPS量效组:RACK1、rac1及p-Akt蛋白表达量均呈浓度依赖性增加,各蛋白组组内比较差异均有统计学意义:(F=120.455,P＜0.001)、(F=165.813,P＜0.001)及(F=309.346,P＜0.001).②LPS时效组:RACK1和rac1蛋白表达呈时间依赖性增加,LPS刺激24h后达最高,各蛋白组组内比较差异均有统计学意义:(F=454.034,P＜0.001)和(F=423.630,P＜0.001);p-Akt表达自3 h(0.460±0.089)上调,12h达最高(2.022±0.244),24 h(1.264±0.074)仍高于0h(0.237±0.063),组间比较差异有统计学意义(F=137.726,P＜0.001).③IGF-1时效组:IGF-1诱导PMVEC表达RACK1、rac1及p-Akt呈时间依赖性增加,各组组间比较差异有统计学意义(F=188.293,P＜0.001)、(F=115.071,P＜0.001)及(F=60.175,P＜0.001).④LY294002干预组:LPS+LY294002作用PMVEC后:RACK1蛋白表达量较LPS组下调[(0.732±0.137) vs(1.498±0.167),P＜0.001];rac1蛋白表达量较LPS组下调[(0.758±0.084)vs(1.384±0.170),P＜0.001];p-Akt蛋白表达量较LPS组下调[(0.492±0.148) vs (1.106±0.219),P＜0.001].结论 PI3K/Akt信号通路通过干预RACK1和rac1表达,参与LPS致PMVEC损伤.