SHP-2shRNA联合苦参碱对宫颈癌细胞增殖的影响
Effect of SHP-2 shRNA combined with matrine on proliferation of cervical cancer cells
目的 应用RNA干扰技术构建SHP-2基因重组慢病毒载体,研究SHP-2shRNA联合苦参碱对宫颈癌Hela细胞生长增殖的影响.方法 靶向构建SHP-2的shRNA序列慢病毒载体,将其转染至人宫颈癌Hela细胞以沉默SHP-2基因,用Real-time PCR(RT-PCR)测定Hela细胞SHP-2 mRNA,应用Western blot法测定SHP-2蛋白表达,CCK8法测定SHP-2基因沉默联合苦参碱对Hela细胞增殖的影响.结果 设计并成功构建3组SHP-2基因的干扰序列(SHP-2 shRNA1、SHP-2 shRNA2和SHP-2 shRNA3)以及对照序列(NS),RT-PCR检测结果表明SHP-2 shRNA2慢病毒载体干扰效率最佳.筛选稳定细胞后荧光显微镜观察感染效率较高,Western blot结果显示细胞中SHP-2蛋白表达明显被抑制.CCK8提示细胞的生长增殖能力明显受限,且随着时间延长,联合组(SHP-2 shRNA2+苦参碱)增殖最慢,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建出SHP-2基因的shRNA慢病毒干扰系统,SHP-2基因沉默联合苦参碱可影响宫颈癌细胞增殖.
更多- 浏览:121
- 被引:0
- 下载:26
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文