miR-21在抗结核药物性肝损伤细胞中的机制研究

Functional study of miR-21 in anti-tuberculosis drug-induced liver injury cells

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摘要目的探讨miR-21在抗结核药物性肝细胞损伤中的作用机制.方法培养人正常肝细胞(HL-7702),以最佳三药联合浓度构建肝损伤细胞模型,将细胞分为6组:control组、药物组、药物+ miR-21 inhibitor组、inhibitor阴性对照组、药物+ miR-21 mimics组、mimics阴性对照组.苏木精-伊红染色法(HE染色)观察各组细胞形态学变化;赖氏法检测各组丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平变化;实时荧光定量PCR (RT-PCR)法检测miR-21及核转录因子κB (NF-κB)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)的mRNA表达变化;Western blot法检测各组NF-κB蛋白表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)法检测各组炎症因子TNF-α、IL-6表达水平.结果与control组相比,药物组细胞miR-21表达升高,NF-κB、TNF-α、IL-6的mRNA及蛋白水平均升高;过表达miR-21可上调炎症调节因子NF-κB的mRNA及蛋白表达,同时炎症因子TNF-α、IL-6的mRNA及蛋白水平也进一步上升;而敲减miR-21则使NF-κB、TNF-α、IL-6的mRNA及蛋白水平降低(均P＜0.05).结论抗结核药物性肝损伤细胞中miR-21表达升高;下调miR-21可使炎症因子的表达水平降低,以减轻肝细胞损伤.