过表达NDRG1通过调控VEGF/sFlt-1轴增强缺氧条件下滋养细胞的促血管形成能力
Overexpression of NDRG1 enhances the pro-angiogenesis ability of trophoblast cells under hypoxic by regulating VEGF/sFlt-1 axis
摘要目的 探讨缺氧条件下N-myc下游调节基因1(NDRG1)过表达对滋养细胞HTR-8/SVneo促血管形成能力的影响.方法 构建NDRG1过表达慢病毒载体并感染HTR-8/SVneo细胞,建立NDRG1基因稳定过表达的HTR-8/SVneo细胞株,随后采用低氧(1%O2)干预24 h.qRT-PCR检测缺氧后细胞中NDRG1、血管内皮生长因子(VEGF)和可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)mRNA表达水平;Western blot检测细胞中NDRG1、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9等蛋白表达水平;ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF和sFlt-1蛋白含量;小管形成实验检测细胞体外促血管形成能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力.结果 缺氧可诱导HTR-8/SVneo细胞中NDRG1、VEGF、sFlt-1等mRNA表达,并促进NDRG1蛋白表达及VEGF和sFlt-1蛋白的分泌,还可抑制MMP-2、MMP-9等蛋白表达以及降低细胞体外促血管形成能力和侵袭能力.NDRG1过表达可促进低氧条件下HTR-8/SVneo细胞VEGF mRNA的表达和蛋白的分泌,同时抑制sFlt-1 mRNA表达及其蛋白的分泌.此外,NDRG1过表达还可上调低氧条件下HTR-8/SVneo细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达水平,并促进细胞体外血管形成能力及侵袭能力.结论 NDRG1过表达可增强缺氧条件下滋养细胞的促血管形成能力和侵袭能力,其机制可能与促进VEGF表达和抑制sFlt-1表达有关.
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