E2F1 siRNA通过抑制血红素诱导的神经元凋亡发挥保护作用

E2 F1 siRNA attenuates hemin-induced primary cortical neuronal injuries

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摘要目的探讨E2F转录因子1(E2F1)在血红素诱导的大鼠原代皮层神经元损伤中的作用及机制.方法体外培养大鼠原代皮层神经元并鉴定,采用不同浓度血红素处理神经元,12 h后LDH实验及MTT实验检测细胞损伤;免疫荧光双染观察神经元E2F1定位;Western blot检测神经元E2F1表达;将神经元分为溶剂组(DMSO组)、损伤组(Hemin组)、阴性对照组(Hemin+Control siRNA组)、治疗组(Hemin+E2F1siRNA组)进行TUNEL染色及caspase活性检测.结果神经元培养至第7天,NeuN染色阳性率达95％;血红素(50、100、200μmol/L)处理后神经元LDH释放率增加、细胞生存率降低、E2F1表达上调(F=22.9,P<0.05);与阴性对照组相比,治疗组神经元LDH释放率降低([(73.6±5.2)％vs(42±4.1)％,F=343.4,P<0.05]、细胞生存率升高[(28.7±3.4)％vs(61±2.9)％,F=127.7,P<0.05];TUNEL结果显示血红素诱导神经元凋亡增加,治疗组凋亡减少(F=67.2,P<0.05);caspase活性检测显示血红素损伤组神经元caspase-3、caspase-8、caspase-9活性升高(t=15.7,t=9.7,t=7.8,P<0.05),治疗组caspase-3、caspase-8、caspase-9活性降低(t=8.6,t=7.3,t=5.7,P<0.05).结论 E2F1 siRNA可能通过抑制血红素诱导的神经元凋亡而发挥神经保护作用.