藏红花素抑制AKT和STAT3的活化对黑色素瘤A375细胞裸鼠移植瘤生长、运动及多器官病变的影响
Effect of crocin inhibiting the activation of AKT and STAT3 on the growth, movement and multiple organ lesions of transplanted melanoma A375 cells in nude mice
摘要目的 探索藏红花素对黑色素瘤A375细胞生长、运动和对肿瘤引起的多器官病变的影响是否存在AKT和STAT3信号通路的参与,以及该通路相关蛋白的表达情况.方法 建立黑色素瘤A375细胞裸鼠皮下移植瘤模型,将小鼠随机分成4组,分别用0、20、50、100 mg/kg浓度的藏红花素和生理盐水对瘤体进行局部注射,每次0.1 ml,观察瘤体变化.免疫组织化学法检测Ki67、Caspase-3的含量以及血管内皮细胞生长因子(VEGF)和波形蛋白(Vimetin)的表达;RT-PCR检测生长标志物Survivin、Bcl-2/Bax基因的表达;HE染色观察肝、肺、肾的组织病理形态;免疫印迹法检测运动和上皮-间质转化(EMT)标志物E-cadherin、N-cadherin以及Fibronectin的蛋白表达以及蛋白激酶B(AKT)和信号转导和转录激活因子3(STAT3)的磷酸化情况.结果 与对照组比较,藏红花素低、中、高剂量组黑色素瘤体积减小,重量降低(P<0.05);Ki67、VEGF、Vimentin阳性细胞数减少(P<0.05),Caspase-3阳性细胞增加(P<0.05);Survivin mRNA的表达降低(P<0.05);Fibronectin蛋白表达水平降低(P<0.05).与对照组比较,藏红花素中、高剂量组黑色素瘤中Bcl-2/Bax mRNA的表达降低(P<0.05);E-cadherin、N-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05);AKT和STAT3的磷酸化水平降低(P<0.05).结论 藏红花素通过抑制AKT和STAT3的磷酸化,减轻肝、肺和肾组织的病理形态学改变,抑制A375黑色素瘤的生长和运动,表明藏红花素对A375黑色素瘤有缓解作用,可减轻肝、肺、肾的组织损伤.藏红花素可以作为有效的调节剂用于预防和治疗黑色素瘤.
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