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槲皮素通过调控CLDN6基因表达量对子宫内膜异位症细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制研究

The mechanisms and effects of quercetin on the proliferation, migration and invasion of endometriosis cells by regulating the expression of CLDN6 gene

摘要目的 探讨槲皮素(Que)对紧密连接蛋白6(CLDN6)的表达及子宫内膜异位症细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并初步分析其可能作用机制.方法 选取40例子宫内膜异位症患者为研究对象,活检时切取异位子宫内膜组织,分离与培养异位子宫内膜间质细胞(EcSCs).以不同浓度(0、12.5、25、50 μmol/L) Que干预EcSCs,通过MTT法检测不同浓度Que对EcSCs细胞增殖的影响,Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)与CLDN6蛋白表达.应用Tran-swell迁移及侵袭实验检测细胞迁移及侵袭情况.EcSCs中转染阴性对照(si-control)、si-CLDN6,并分析沉默CLDN6表达对EcSCs细胞增殖、迁移和侵袭的影响.后续实验分为4组:NC组、Que组、Que+ pcDNA组、Que+ pcDNA-CLDN6组,MTT与Transwell迁移及侵袭实验分别检测各组EcSCs增殖、迁移及侵袭能力,Western blot法检测PCNA、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、上皮-间质转化(EMT)及整合素连接激酶(ILK)信号通路相关蛋白表达.结果 Que干预后EcSCs增殖、迁移及侵袭能力受到抑制,且呈剂量依赖性,可抑制CLDN6、PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白表达;沉默CLDN6表达后能够抑制EcSCs增殖、迁移及侵袭能力;Que可抑制神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、ILK、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达,促进E-cadherin蛋白表达,但转染CLDN6过表达载体后可逆转Que对EcSCs增殖、迁移及侵袭的抑制作用.结论 Que可通过抑制CLDN6表达而抑制子宫内膜异位症细胞增殖、迁移及侵袭,其可能作用机制为抑制ILK信号通路活化及EMT转换进程.

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DOI 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.10.004
发布时间 2020-10-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
广东省科技计划(2010B031600197)
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