电针预处理对小鼠脑缺血后谷氨酸转运体2的影响
Effect of electroacupuncture pretreatment on glutamate transporter 2 after cerebral ischemia in mice
摘要目的 探索谷氨酸转运体2(EAAT2)在电针预处理减轻小鼠脑缺血中的作用.方法 32只雄性C57BL/6小鼠,随机法分4组(n=8):全脑缺血再灌注(BCCAO)组、电针预处理(EA)+BCCAO组、EAAT2抑制剂二氢卡因酸盐(DHK)+ EA+ BCCAO组、EAAT2激动剂头孢曲松钠(CXT)+BCCAO组.BCCAO组仅结扎双侧颈总动脉,DHK+ EA+BCCAO组和EA+BCCAO组行电针预处理,30 min/次,1次/d,连续5d,其中DHK+ EA+ BCCAO组缺血前1h侧脑室注射DHK 200 μg/kg.CXT+ BCCAO组腹腔注射头孢曲松钠600 mg/kg,1次/d,连续5d.预处理后24h全脑缺血20 min,神经行为学评分和HE染色计算海马CA1区凋亡神经元.Western blot法检测EAAT2蛋白表达,免疫荧光双标染色检测EAAT2和星形胶质细胞活化标志物(GFAP).结果 与BCCAO组比较,EA+ BCCAO组和CXT+ BCCAO组行为学评分升高,凋亡神经元数目减少(P<0.05);DHK+ EA+ BCCAO组与EA+ BCCAO组比较,神经行为学评分降低,凋亡神经元数目增多(P<0.05).Western blot结果:与BCCAO组比较,EA+BCCAO组和CXT+BCCAO组EAAT2蛋白表达水平升高(P<0.05);DHK+ EA+ BCCAO组与EA+ BCCAO组比较,EAAT2蛋白表达水平下降(P<0.05).免疫荧光双标染色:与BCCAO组比较,EA+ BCCAO组和CXT+BCCAO组EAAT2和GFAP蛋白表达增加(P<0.05);DHK+EA+BCCAO组与EA+BCCAO组比较,EAAT2和GFAP蛋白表达降低(P<0.05).结论 电针预处理通过调节星形胶质细胞膜上EAAT2产生脑缺血耐受作用.
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