小檗碱调节AKT/NF-κB信号通路对高糖诱导的足细胞损伤、凋亡和迁移的影响

Effects of berberine on podocyte injury,apoptosis and migration induced by high glucose through regulating AKT/NF-κB signaling pathway

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摘要目的探究小檗碱(BBR)对高糖环境下足细胞的保护作用及其机制.方法取指数生长期的足细胞进行实验,将细胞分为五组:正常组,高糖组,BBR 30、60、90 μmol/L组.Annexin FITC/PI双染法检测足细胞凋亡率,高内涵成像系统计算细胞数量,Transwell和细胞划痕实验检测其迁移能力,Western blot检测蛋白激酶B/核转录因子κB(AKT/NF-κB)信号通路相关蛋白、细胞促凋亡蛋白(Bim)和足细胞标志性蛋白WT-1、Podocin、desmin的表达水平.结果与正常组相比,Annexin FITC/PI双染法结果显示,高糖组足细胞凋亡率上升(P＜0.01);高内涵细胞成像系统显示足细胞数量减少(P＜0.01);Transwell结果显示迁移至下室的足细胞数增加(P＜0.01);细胞划痕实验结果显示划痕愈合率上升(P＜0.01);Western blot结果显示,高糖组足细胞中p-AKT、p-p65、p-IκBα、Bim、desmin 蛋白表达水平升高(P＜0.01),WT-1、Podocin蛋白表达水平降低(P＜0.01).与高糖组相比,BBR给药后足细胞凋亡率下降(P＜0.05);不同浓度BBR给药组的足细胞数量增多(P＜0.01);迁移至下室的足细胞数有所减少(P＜0.05);划痕愈合率下降(P＜0.01);另外,BBR 给药降低了 p-AKT、p-p65、p-IκBα、Bim、desmin 蛋白表达水平(P＜0.05),同时升高了 WT-1、Podocin蛋白表达水平(P＜0.01).结论 BBR可能通过AKT/NF-κB信号通路改善高糖诱导的足细胞损伤、抑制足细胞凋亡、减弱足细胞迁移能力.