换一批新型冠状病毒核酸荧光型RT-RAA检测方法的建立及其评价
Establishment and evaluation of fluorescence RT-RAA detection method for SARS-CoV-2 nucleic acid
摘要目的 建立新型冠状病毒(SARS-CoV-2)荧光型RT-RAA快速检测方法.方法 以体外转录SARS-CoV-2的RNA为模板,利用单链DNA结合蛋白、重组酶和DNA聚合酶,在40.5℃恒温下,快速完成orf1ab基因和S基因序列片段的扩增,并用已知新冠核酸阳性和其他呼吸道病毒感染患者咽拭子标本进行初步评价.结果 该研究建立的方法分别检测SARS-CoV-2两种基因的所需时长均在20 min以内,检测2种基因的灵敏度均为2拷贝数/反应管,特异性为100％,2种引物的最低检出限3次重复实验扩增反应起峰时间一致,曲线形态接近.结论 该研究建立的方法灵敏性高,特异性强,重复性良好,临床标本检测结果符合率高,且不需要昂贵的仪器,适用于现场快速检测.
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分类号
R373.1
栏目名称
DOI
10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.06.029
发布时间
2021-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（编号:81772203）；
"十三五"国家科技重大专项（编号:2018ZX10711001）；
安徽省科技厅新型冠状病毒应急攻关项目（编号:202004a07020010）；
安徽医科大学应急攻关项目（编号:YGJJ202007）
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